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第五十四期 Toyopearl HW系列分子篩填料在天然產物純化中的應用

2015年02月11日來源:管理員
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TOYOPEARL HW 和 TSKgel PW 型尺寸排阻樹脂是所有東曹公司離子交換、疏水作用和親合層析填料產品的基質。在初步聚合反應產生特定的填料粒徑和孔徑后,通過化學修飾改變樹脂表面特征以獲得特定的產品。TOYOPEARL HW產品屬于羥基化的聚甲基丙烯酸類樹脂。通過化學手段,獲得不同粒徑(30μm或以上)和孔徑大小的TOYOPEARL HW型尺寸排阻填料。它們與TSKgel PW填料相比,交聯度更低。低交聯使得在生產以TOYOPEARL HW為基質的離子交換和疏水填料時,能夠提供更多的配體固定化反應或修飾位點。因此,與相應的TSKgel PW 基質相比,修飾后的TOYOPEARL HW 樹脂填料具有更高的動態吸附載量。HW 和 PW 樹脂填料由于具有同樣的基質骨架,相同類型官能團的填料對于蛋白質或雜質的保留具有相似的選擇性。 TOYOPEARL HW 樹脂填料,可以在高線性流速下使用,且能承受高達3bar的工作壓力。

Toyopearl

分子量排阻范圍

Sephadex

右旋糖酐

蛋白

HW-40

100-7000

100-10000

LH-20,G-25

HW-50

500-20000

500-80000

G-75,G-100,G-150

HW-55

1000-200000

1000-700000

G-100,G-200

HW-65

10000-1000000

50000-1000000

6B,4B

HW-75

100000-10000000

500000-50000000

4B,2B

填料粒徑?? S級:20-40μm

?????????? F級:30-50μm

?????????? C級:50-100μm

?????????? EC級:100-300μm(只針對HW-40提供EC級粒徑的填料)

與糖相比,由于蛋白結構緊湊,因此同類分子篩填料對糖和蛋白的排阻界限有所差別。Toyopearl填料的骨架為含羥基的親水性聚甲基丙烯酸樹脂,由于不含糖基,與多糖類填料相比,不會和糖類樣品發生非特異性相互作用。

使用HW填料對各種糖類進行分析的應用匯總表

?

化合物

Toyopearl填料

備注

酸性環糊精/Acidic cyclodextrin

SP-650C,HW-40F

*

酸性寡糖/Acidic oligosaccharide

DEAE-650M

1-100 mM KCl梯度

抗肝炎多糖/Anti-hepatitis ? polysaccharide

DEAE-650C

*

支鏈低聚果糖/Branched ? fructooligosaccharide

HW-40S

*

致癌物抑制劑/Carcinogen promoting ? inhibitor

HW-65F

*

性腺A/Gonaderan A

DEAE-650

*

紫草多糖/Lithosperman A

DEAE-650

*

麥芽戊糖苷/Maltopentoside

HW-40S

流動相:水

多糖/Polysaccharide

HW-65F

0.1 ? ?M NaCl

淀粉/Starch

HW-75F


TX-1多糖/TX-1 ? polysaccharide

HW-65F

*

?

低分子生物活性物質的分離


化合物

Toyopearl填料

備注

Acakyphidins

HW-40


花青素/Anthocyanin

HW-40F


蒽醌/Anthraquinone

DEAE-650C

*

Black vinegor

HW-50F

流動相:水

兒茶酚/Catechin

HW-40


栗癭鞣質/Chestanin

HW-40F

流動相:50%的甲醇

地高辛/Digoxin

HW-40F

流動相:50%的甲醇

Epigarocatechin

HW-40


黃烷/Flavan

HW-40C


類黃酮配糖類/Flavonoid glycoside

HW-40


沒食子酰熊果酚苷/Galloylarbutin

HW-40F


異黃酮/Isoflavonoid

HW-40

流動相:甲醇/水=70/30

哇巴因/Ouabain

HW-40F

流動相:50%的甲醇

植物生長激素/Plant growth hormone

HW-40


多酚/Polyphenol

HW-40C, ? HW-40EC


花色素低聚物/Proanthocyndin oligomer

HW-40F

*

原花青素/Procyanidine

HW-40S,HW-40F


丹寧酸/Tannin

HW-40


茶黃素/Theaflavin

HW-40

*

?

結論:

?

Toyopearl HW-40 系列填料具有很多的優勢:

?

1. 優異的剛性強度和化學穩定性

?? * 可以放大至更大的制備規模和獲得更高的流速(適用于超過200L的層析制備柱)

?? * 適用于強堿溶液

2. 4種不同的粒徑可供選擇

?? * S級(30μm)、F級(45μm)、C級(100μm)和EC級(200μm)

?? * 高分辨率、高流速。

3. 適用于水和各種有機溶劑

?? * 甲醇、乙腈、丙酮、四氫呋喃等等

?? * 根據樣品的溶解性來選擇合適的有機溶劑(流動相)

?

Toyopearl 填料使用上的注意點:

?

1.???? 裝填前的勻漿準備

Toyopearl系列產品出貨時保存在20%的乙醇中(乙醇/水=20/80)。需要注意的是,如果需要在氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯等非極性溶劑中使用時,需要進行逐步置換,而不能進行互不相溶的溶液間的直接替換。

2???? 填料的裝填

Toyopearl填料的剛性強度好,相比瓊脂糖、葡聚糖基質的軟膠來講,更適宜在高流速下進行裝填以便獲得更高柱效、更高分辨率的層析柱。



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