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第二十三期 日本信和化工(SHINWA CHEMICAL INDUSTRIES)手性色譜柱簡介

2015年02月11日來源:管理員
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日本信和公司是生產氣相和液相色譜柱的公司。其中 ULTRON ES –OVM 系列手性液相色譜柱,是一種硅膠鍵合蛋白質型手性色譜柱。手性分離是基于疏水相互作用和極性相互作用實現,其符合美國藥典 L57,可分析硫酸氫氯吡格雷。

手性色譜柱綜合簡介

手性色譜柱(Chiral HPLC Columns) 由具有光學活性的單體,鍵合在硅膠或其它聚合物上制成的固定

相(Chiral Stationary Phases)。通過引入手性環境使對應異構體間呈現物理特征的差異,從而達到光學異

構體拆分的目的。

根據手性固定相和溶劑的相互作用機制分類

第 1 類: 通過氫鍵,∏-∏作用,偶級-偶級作用形成復合物,刷型就屬于此類手性色譜。

第 2 類: 既有類型 1 中的相互作用,又存在包埋復合物。此類手性色譜柱中典型的是由纖維素及其衍生物制成的手性色譜柱。

第 3 類:基于溶劑進入手性空穴形成包埋復合物。這類手性色譜柱中最典型的是環糊精型手性柱,另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物。

第 4 類: 基于形成非對映體的金屬絡合物,也稱為手性配位交換色譜柱(CLEC)。

第 5 類: 蛋白質型手性色譜柱。手性分離是基于疏水相互作用和極性相互作用實現。


根據固定相的化學結構,將手性色譜柱分為以下幾種

刷(Brush)型成稱為 Prikle 型

纖維素(Cellulose)型

環糊精(Cyelodextrin)型

大環抗生素(Macrocyclic antibiotics) 型

蛋白質(Protein)型

配位交換(Ligand exchange) 型

冠醚(Crown eters)型

1. 刷型

刷型手性色譜柱是根據三點識別模式設計的,刷型手性固定相分為∏電子接受型和∏電子提供型兩類。最常見的∏電子接受型固定相是由(R)-N-3,5-二硝基苯甲酰苯基甘氨酸鍵合γ-氨丙基硅膠。

刷型固定相出現了∏電子供給和接受基的混合固定相,十分適用于β-阻斷劑的手性分離。美國REGES,日本住友(SCAS)公司和 YMC 公司是專業提供此類手性柱的制造商。

2. 纖維素型

纖維素固定相的每個單元都為螺旋型,并且這種螺旋結構還存在極性作用, ∏-∏作用及形成包埋復合物等手性分離因素。目前此類型的柱子從分離 80%左右可能面臨到的所有手性化合物。此類柱子通常用于正相系統,用正己烷-乙醇,正己烷-異丙醇混合溶劑為流動相。這種類型的手性色譜柱的主要制造商之一是日本大賽璐(DAICEL)公司。


3.環糊精型

環糊精分子成錐筒型,構成一個洞穴,洞穴的孔徑由構成環糊精的吡喃葡萄糖的數目決定,這意味著洞穴內部是相對疏水的區域。環糊精手性固定相產生手性識別要求被拆分物的疏水部分能嵌入環糊精洞穴中,形成可逆的,穩定性不同的包合物,環糊精洞口的羥基和被拆分物的極性基團相互作用。環糊精固定相的選擇性取決于分析物的分子大小;α-環糊精只能允許單苯基或萘基進入,β-環糊精手性固定相應用范圍最廣。

最近,對環糊精的修飾使環糊精型手性色譜柱可以分離更多的化合物,并可用于氣相手性色譜分離。這些新型的環糊精固定相有許多優點,它們可以分離更多化合物,價格上也有競爭力。由于改進了手性識別能力使其更適用于制備色譜,比如:德國默克(Merck)和日本住友(SCAS),日本大賽璐(DAICEL)和日本信和(SHINWA)公司都有生產。

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4配位交換型

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手性配位交換色譜(Chiral Ligand Exchange Chromatography,CLEC)是通過形成光學活性的金屬絡合物而達到手性分離,主要用于分離氨基酸類和乳酸類。

日本三菱化學(MITUBISHI CHEMICAL)和大賽璐(DAICEL)公司和日本住友(SCAS)公司生產此類色譜柱。

5.大環抗生素型

大環抗生素型手性色譜柱是最近發展起來的,通過將大環抗生素鍵合到硅膠上制成的新型手性色譜柱。此類色譜柱常用的大環抗生素主要有三種:利福霉素(Rifamycin),萬古霉素(Vancomycin),替考拉寧(Ticoplanin)。利福霉素作為手性添加劑在毛細管電泳分離手性化合物方面得到了成功運用。萬古霉素和替考拉寧分子結構中存在”杯”狀結構區和糖”平面”結構區。此類色譜柱性質穩定,可用于多種分離模式,非常適用于制備色譜。美國 ASTEC 公司生產此類色譜柱。

6.蛋白質型

蛋白質型手性柱依賴于疏水相互作用和極性相互作用原理實現分離,目前已經有多種蛋白質被應用于鍵合手性柱固定相。應用較多的是α-酸性糖蛋白(α-Acid Glycoprotein,AGP),人血清白蛋白(HumanSerum Albumin,HSA),牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)和卵類粘蛋白由蛋清中提取,分子量為 55,000,它可分離大量的胺類和酸類化合物,該柱的應用比較廣,但一些有機溶劑(如乙腈,甲醇)可使蛋白變性,因此使用起來要特別注意。該類柱由日本信和(SHINWA)公司和英國(Chrom Tech)公司生產。

7.冠醚型

冠醚類固定相用于分離一級胺,一級胺必須質子化方能達到分離。因此必須使用酸性流動相,如高氯酸。最常用的是冠醚類固定相是 18-冠-6.無論(+)或(-)型均可達到有效分離,并可通過變化(+)(-)類型而改變分析物出峰順序。此類手性色譜柱生產商有日本大賽璐(DAICEL)公司和日本住友(SCAS)公司。


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